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对 PCR实验室布局和通风系统设计的探讨

文章作者:admin 发布时间:2021-05-25 13:41:18 浏览次数:0
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  PCR实验室又称基因扩增实验室。聚合酶是聚合酶链反应的简称。这种分子生物技术可以扩增特定 DNA,并被认为是体外特异性 DNA复制。该方法具有灵敏度高,特异性强,快速,简便等优势。该技术能将传统方法难以检测到的少数病毒的 DNA扩增100多万倍,大大提高疾病的诊断水平。该技术既可用于基础研究,如基因分离、克隆和核酸序列分析,又可用于疾病诊断或任何含有 DNA和 RNA的地方,也称为无细胞分子克隆或 DNA序列特异性体外引物定向酶促扩增技术。

  1.聚合酶链反应实验室布置

  聚合酶链反应扩增实验室原则上分为三个独立的工作区域:试剂储藏和制备区域,样品制备区域,扩增和扩增产物分析区域。为避免交叉污染,进入每个工作区必须严格遵循一个方向,即只可从试剂贮存和制备区域到样品制备区域再到扩增和扩增产物分析区域。试验室与试样之间的转移应通过转移窗口进行。

  2.PCR实验室实验室空气调节通风系统和压力控制的设计

  聚合酶链反应实验室对纯化水平没有严格要求,但为避免试验室间交叉污染的可能性,建议采用完全输送和完全排放的气流组织形式。与此同时,应严格控制送排风比例,确保各实验区的压力要求。

pcr实验室

  (1)试剂的存放和准备区域

  本实验室的主要工作是:贮存试剂的制备,试剂的分装,主反应混合物的制备。试样制备所用的试剂和材料应直接运送至本地区,不能通过其他地区。配料试剂存放在本区域,所需的试剂在本区域备好。为控制气压,该区域对外界保持轻微的正压力。

  (2)标本准备区

  在 PCR实验室的主要工作是样品保存,核酸(RNA和 DNA)的提取和存储,扩大反应管的加入, DNA合成的检测等。为了避免气溶胶污染从邻近区域进入,要求该区域的压力梯度相对于邻近区域为正数。另外,采样工作中可能会产生气溶胶污染,因此应该避免在采样区域内不必要的行走。

  (3)产物扩增和分析区

  本课题主要研究 DNA扩增及扩增片段的检测。另外,还可在该区域添加已制备的 DNA模板(从样品制备区),并将主反应混合物制备到反应混合物中(从试剂储存和制备区)。为了避免气溶胶泄漏, PCR实验室区域的压力梯度必须与附近区域的负压相对应。


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